Para llegar a la etiología de una enfermedad es necesario que las muestras que se envíen sean tomadas y enviadas en forma correcta. Es imprescindible, cualquier sea el caso, que estas sean extraídas en la forma lo mas aséptica posible. Exigir al laboratorio de diagnóstico instructivos en donde se detallen la forma de retirar y enviar el material para cada enfermedad en particular, como así también las técnicas a realizar y el tiempo de demora del procesamiento de estas. Es imprescindible que junto al material se adjunte una ficha en donde se detalle la historia del caso (especie, categoría y número de animales afectados, duración del brote, si se presentó en otras oportunidades, vacunaciones, etc.), la revisación clínica del animal, los tratamientos efectuados, diagnóstico presuntivo y tipo de trabajo solicitado. Es importante para el laboratorista disponer de esta información para poder aplicar las técnicas pertinentes y obtener un resultado lo más rápido posible.
Materiales
Las muestras deben ser colocadas en envases estériles y con cierre hermético. El instrumental que se utiliza para la extracción de muestras debe estar limpio, seco, bien afilado y estériles o en su defecto previo a su uso sumergirlos en un recipiente con alcohol y flamearlos (no usar desinfectantes químicos como espadol, lugol, etc.).
Para el envío de materiales tener en cuenta lo siguiente: para realizar la necropsia sacrificar un animal enfermo, debido que en un animal agonizante o muerto recientemente hay invasión de bacterias intestinales a tejidos y órganos, lo que provocará la falla o confusión del diagnóstico etiológico, al retirar las muestras mantener las mejores condiciones de asepsia, no enviar muestras los fines de semana o vísperas de feriados, contactar con el laboratorio para confirmar el envío, adecuar e identificar el material correctamente y antes de transportar muestras de sangre extraer previamente el suero.
Para bacteriología las muestras tienen que ser enviadas refrigeradas (4-8 ºC) y si el envío se excede las 12-24 hs. congelar. Se pueden utilizar medios de transporte como el AMIES o el STUART.
En el diagnóstico virológico se utilizan los medios de transporte HANKS o MEM o PBS con antibióticos. Para aislamiento remitir el material refrigerado (4 ºC), dentro de las 12- 24-hs. posteriores a la extracción y sin excede este tiempo es conveniente congelar el material. Remitir sangre con anticoagulante para aislamiento y suero para serología.
Para histopatología las muestras tienen que tener un tamaño de 1 x 1 cm y ser enviadas en formol al 10 %.
Toma y envío de muestras
Líquidos y contenidos de cavidades se toman con jeringas y agujas estériles, luego pasarlos a recipientes estériles con tapa rosca.
Secreciones deben extraerse con hisopos estéril con medios de transporte o suero fisiológico estéril.
Sueros: El material a utilizar (tubos, jeringas, etc.) debe estar seco, limpio y estéril ya que los restos de humedad y partículas de suciedad provocan hemólisis. Rotular los tubos (utilizar marcador indeleble). Las muestras de sangre se extraerán sin anticoagulantes en tubos de 10 a 15 mL, mantenerlas durante 1 hora a 37 ºC o a temperatura ambiente al sol y luego refrigerarla durante un máximo de 48 horas. No congelar la sangre porque se hemoliza. Luego de formado el coágulo, separar el suero y colocarlo en recipientes estériles y roturarlos. El suero congelado puede guardarse durante un tiempo prolongado (meses).
Órganos: Primero observar los órganos externamente y luego extrae trozos, de un tamaño de 5 x 5, bajo las máximas condiciones de asepsia. Las muestras incluirán trozos de aspecto normal y donde se localicen lesiones.
Los órganos de elección son el bazo, pulmón, hígado, riñón y hueso largo (descarnado).
Si los órganos presentan contaminación, flamearlo superficialmente.
El intestino se envasará por separado y con sus extremos ligados para mantener su contenido.
Las muestras de cerebro enviarlas una parte refrigerada y otra con formol al 10%.
Conservación y envío del material: los recipientes identificados se colocan en heladera isotérmica con refrigerantes. Agregar papel para conservar el frío y proteger los envases.
A continuación se detallan la remisión de material para alguna de las enfermedades más importantes:
Carbunco bacteridiano
Remitir el siguiente material:
a) Muestras de sangre exudada con hisopos o extracción con aguja y jeringa de la vena yugular de un animal recientemente muerto.
b) Hueso largo, limpio (descarnado), envuelto en papel y polietileno.
c) Frotis de sangre secados al aire o calor.
No realizar la necropsia de los animales muertos con sospecha de carbunco bacteridiano.
Si la necropsia es realizada extrae trozos de bazo. En equinos extraer linfonódulos hemorrágicos e hisopados de exudados y en cerdos obtener muestras de linfonódulos retrofaríngeos y de edema.
Es importante incinerar o enterrar con cal viva los cadáveres lo más rápido posible.
En el caso de que personas mantuvieran contacto con material sospechoso de Carbunco remitirse directamente al servicio médico más cercano.
Mastitis
En primera instancia lavar y secar los cuartos mamarios. Luego pasar una servilleta de papel descartartabe con alcohol 70º en cada cuarto. Ordeñar descartando los primeros chorros de leche y recolectar en un recipiente estéril de boca ancha y con cierre hermético (utilizar un recipiente por cuarto).
Diarrea neonatal
Enviar materia fecal de animales con síntomas en medio de transporte Cary Blair. Realizar necropsia y enviar: duodeno y yeyuno ligados en los extremos, frotis de la mucosa y/o contenido intestinal, hígado, bazo, ganglios mesentéricos y cualquier órgano que presente lesiones.
Neumonías
Enviar hisopados nasofaríngeos de animales enfermos y si se realiza la necropsia trozos de pulmón afectado, líquido pleural o pericárdico, linfonódulos mediastínicos.
Querato conjuntivitis bovina
Enviar placas de agar sangre sembradas con hisopos de animales enfermos en la etapa aguda de la enfermedad. Colocar el hisopo en medio de transporte Stuart y remitirlos junto con las placas.